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豬肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)
發(fā)布時(shí)間:2025/5/29瀏覽:116次
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  豬肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明書(shū)

  BS-8208 豬肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA試劑盒

  以下是天津本生豬肝素結(jié)合性表皮生長(zhǎng)因子(HB-EGF)ELISA試劑盒的實(shí)驗(yàn)使用說(shuō)明綜合整理:

  一、實(shí)驗(yàn)原理

  采用雙抗體夾心法(或一步夾心法)檢測(cè)樣本中的HB-EGF濃度。通過(guò)包被抗體捕獲目標(biāo)蛋白,再結(jié)合酶標(biāo)抗體形成復(fù)合物,經(jīng)TMB顯色后測(cè)定OD值,濃度與吸光度呈正相關(guān)。

  二、試劑盒組成

  主要成分?

  預(yù)包被微孔板

  標(biāo)準(zhǔn)品(通常含凍干粉,需用稀釋液重構(gòu))

  酶標(biāo)抗體、顯色劑(A/B液)、終止液

  濃縮洗滌液(需稀釋使用)

  保存條件?

  未開(kāi)封試劑需2-8℃保存,標(biāo)準(zhǔn)品及樣本稀釋后建議分裝凍存(-20℃以下),避免反復(fù)凍融。

  三、樣本處理

  血清/血漿?:離心去除雜質(zhì)(1000×g,15-20分鐘),溶血樣本不可用。

  組織勻漿?:需用PBS沖洗后勻漿,離心取上清(5000×g,5-10分鐘)。

  細(xì)胞培養(yǎng)上清?:直接離心(1000×g,20分鐘)后檢測(cè)。

  四、操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品稀釋?:按說(shuō)明書(shū)梯度稀釋(通常為2倍系列稀釋)。

  加樣與溫育?:

  每孔加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本100μL,37℃孵育1-2小時(shí)。

  洗滌?:使用稀釋后的洗滌液洗板4-6次。

  顯色與終止?:

  加入TMB顯色液,避光反應(yīng)10-15分鐘,后加終止液。

  檢測(cè)?:450nm波長(zhǎng)讀取OD值,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算濃度。

  五、注意事項(xiàng)

  避免試劑交叉污染,不同批號(hào)組件勿混用。

  顯色時(shí)間需嚴(yán)格控制,強(qiáng)陽(yáng)性樣本可能需進(jìn)一步稀釋。

  實(shí)驗(yàn)前需平衡所有試劑至室溫(約30分鐘)。

  如需具體參數(shù)(如標(biāo)準(zhǔn)品初始濃度、靈敏度等),請(qǐng)參考試劑盒配套說(shuō)明書(shū)或咨詢技術(shù)老師。

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